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电脑冷冻石蜡切片机厂家谈石蜡切片与其他切片的比较
点击次数:357 发布时间:2018-07-14
   电脑冷冻石蜡切片机厂家谈石蜡切片与其他切片的比较
  石蜡切片把修好的蜡块装在旋转切片机上,即可进行切片。切片必须保持切片刀锐利,切片厚度通常为5-7um,也可根据染色需要切成不同厚度,一般电脑冷冻石蜡切片机不超过10um。切好的蜡带,放人40℃左右的温水中将蜡片展平。良好的切片应无刀痕、裂痕,切片厚度均一平整。切片如有上述问题,在进行免疫组织化学染色时会出现假阳性现象。为能得到平整无皱褶的组织切片。可采用两次展片,即先将组织切片漂浮在30%的乙醇溶液中进行第一次展片,然后将切片捞起,再次放人45-50℃的水浴中进行第二次展片,乙醇的浓度和水温可视组织不同和石蜡熔点的高低自行调整。此过程是利用乙醇溶液与水之间的张力差展开切片的皱褶。为防止脱片,载玻片要涂黏片剂。对HE染色的切片,可在载玻片上涂抹薄层蛋白甘油,但蛋白甘油因含蛋白易导致非特异性免疫反应,故用于免疫组织化学染色的切片常用多聚赖氨酸、3—氨丙基—乙氧基甲硅烷等处理。
  冰冻切片是酶组织化学和免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法,其最突出的优点是能够较完好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶活性以及抗原的免疫活性,尤其是细胞表面抗原更应采用冰冻切片。新鲜组织和已固定的组织均可作冰冻切片。为了得到高质量的冰冻切片,选择好的冰冻切片机和配套的切片机可以把新鲜组织切成20-400pm的厚片,以漂浮法在反应板内进行组织化学或免疫组织化学染色。因组织不冷冻,无冰晶形成也无组织抗原破坏,染色前又避免了组织脱水、透明、包埋等步骤对抗原的损害,故能较好地保留组织内脂溶性物质和细胞膜抗原。振动切片主要用于显示神经系统抗原分布的研究。对于柔软的胚胎脑组织,可用低熔点10%琼脂糖包埋,振动切片机切成厚片,采用漂浮法在反应板内进行免疫荧光组织化学染色,激光扫描共聚焦显微镜观察。
  振动切片方法是利用刀片振动原理,用来将新鲜的活体组织或固定过的组织切成20um的薄片到1mm以上厚片的仪器。一般厚度精度控制大约为1um,如果做荧光染色建议切成薄片。
  几中切片的比较:
  振动切片方法简单、快速,能使组织比较完整保留,适合做或组织电生理学等研究。与冰冻切片相比,不需要对组织冷冻,不会形成冰晶或造成组织抗原的破坏。与石蜡切片相比,不需要脱水、透明、浸蜡等过程,避免对抗原的损害。
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